L'anticorps anti-β-lipoprotéines humaines présent dans le R1 se lie aux lipoprotéines (LDL, VLDL, Chylomicrons), à l'exception des HDL.
Le complexe antigène-anticorps formé bloque la réaction enzymatique qui démarre avec l'ajout du R2.
La cholestérol estérase (CHE) et la cholestérol oxydase (CO), contenues dans le R2, réagissent uniquement avec le cholestérol des HDL.
Le peroxyde d'hydrogène, produit au cours de la réaction enzymatique, est ensuite couplé au chromogène F-DAOS [sel sodique de la N-éthyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-diméthoxy-4-fluoroaniline] et à l'amino-4-antipyrine (4-AA) en présence de peroxydase (POD) et donne un complexe coloré en bleu.
La mesure de l'absorbance du complexe coloré en bleu obtenu, permet de calculer la concentration du cholestérol HDL, par comparaison avec l'absorbance du Calibrateur HDL.
Calibrateur Cholestérol HDL WAKO - Référence : W1W416-51095