Une solution d'acide trichloracétique est ajoutée à l'échantillon pour précipiter les protéines laissant le zinc en solution.
Une fois que les protéines sont éliminées, les réactifs de Coloration A et B sont ajoutés au surnageant.

Le zinc réagit pour donner 5-Br-PAPS, formant un chélate rouge-violet. L'absorption du chélate rouge-violet est mesurée à 560 nm, et est directement proportionnelle à la quantité de zinc dans l'échantillon. Bien que les réactifs de coloration employés peuvent être utilisés pour la détermination de fer, cuivre, cobalt, et nickel, la réaction avec ces autres métaux peut être supprimée en masquant les agents qui sont contenus dans le kit. 5-Br-PAPS chélate stochiométriquement (2 : 1) le zinc.