L’acide oxalique est extrait de l’urine par précipitation avec du sulfate de calcium en milieu hydro-alcoolique.

Il est ensuite oxydé par l’oxalate oxydase pour former du peroxyde d’hydrogène.

Celui-ci, en présence de peroxydase, oxyde le couple diéthylaniline / méthyl-3 benzothiazolinone-2 hydrazone formant un colorant bleu violacé en quantité proportionnelle à la quantité d’oxalate.